Alergenowe reakcje astmatyczne zmodyfikowane przez specyficzny dla GATA3 DNAzym

Najbardziej rozpowszechniony fenotyp astmy charakteryzuje się zapaleniem eozynofilowym zdominowanym przez komórkę T pomocniczą typu 2 (Th2). Celowanie terapeutyczne GATA3, ważnego czynnika transkrypcyjnego szlaku Th2, może być korzystne. Oceniliśmy bezpieczeństwo i skuteczność SB010, nowego enzymu DNA (DNAzyme), który jest w stanie rozszczepić i zdezaktywować informacyjny RNA GATA3 (mRNA). Metody
Przeprowadziliśmy randomizowane, podwójnie ślepe, wieloośrodkowe, kontrolowane placebo badanie kliniczne SB010 z udziałem pacjentów, którzy cierpieli na astmę alergiczną z eozynofilią plwociny i którzy również wykazywali dwufazową wczesną i późną odpowiedź astmatyczną po prowokacji alergenami laboratoryjnymi. W sumie można było ocenić 40 pacjentów; 21 zostało przydzielonych do otrzymywania 10 mg SB010, a 19 zostało przydzielonych do otrzymania placebo, z każdym badanym lekiem podawanym przez inhalację raz dziennie przez 28 dni. Wyzwanie alergenowe przeprowadzono przed i po okresie 28 dni. Pierwszorzędowym punktem końcowym była późna odpowiedź astmatyczna określona ilościowo przez zmianę pola pod krzywą (AUC) dla wymuszonej objętości wydechowej w ciągu sekundy (FEV1).
Wyniki
Po 28 dniach SB010 zmniejszyło średnią odpowiedź w późnej astmie o 34% w porównaniu z wyjściową odpowiedzią, zgodnie z AUC dla FEV1, podczas gdy placebo było związane z 1% wzrostem AUC dla FEV1 (P = 0,02). Wczesna odpowiedź astmatyczna z SB010 była osłabiona o 11%, jak zmierzono za pomocą wartości AUC dla FEV1, podczas gdy wczesna odpowiedź z placebo została zwiększona o 10% (P = 0,03). Hamowanie późnej astmatycznej odpowiedzi przez SB010 było związane z atenuacją eozynofilii plwociny wywołanej przez alergen iz niższymi poziomami tryptazy w plwocinie i niższymi poziomami interleukiny-5 w osoczu. Na wywołane alergenami poziomy ułamkowego wydychanego tlenku azotu i nadreaktywności dróg oddechowych na metacholinę nie wpływał ani SB010, ani placebo.
Wnioski
Leczenie za pomocą SB010 znacząco osłabiło zarówno późną, jak i wczesną odpowiedź astmatyczną po prowokacji alergenem u pacjentów z astmą alergiczną. Analiza biomarkerów wykazała osłabienie reakcji zapalnych regulowanych przez Th2. (Finansowane przez Sterna Biologicals i niemieckie Federalne Ministerstwo Edukacji i Badań, numer ClinicalTrials.gov, NCT01743768.)
Wprowadzenie
Astma jest powszechną przewlekłą chorobą zapalną dróg oddechowych, która charakteryzuje się zmienną niedrożnością dróg oddechowych, nadmiernym wydzielaniem śluzu, zapaleniem dróg oddechowych i nadreaktywnością dróg oddechowych. Uważa się, że rozregulowanie wrodzonych i adaptacyjnych odpowiedzi immunologicznych odgrywa kluczową rolę w rozwoju choroby. Wysoki stopień heterogeniczności międzyosobniczej zidentyfikowany w różnych populacjach pacjentów doprowadził do zdefiniowania kilku klinicznych fenotypów i patofizjologicznych endotypów.1 Odpowiedź alergiczna wywołana przez limfocyt T pomocniczy typu 2 (Th2), 2,3, określana również jako endotyp molekularny Th2, jest uważany za charakterystyczny dla astmy alergicznej.4,5
Około połowa pacjentów z astmą, niezależnie od ciężkości choroby, wykazuje ten endotyp Th2. Endotyp charakteryzuje się przeważającą aktywacją komórek Th2, które produkują cytokiny, takie jak interleukiny 4, 5 i 13. Ekspresję i produkcję wszystkich tych cytokin Th2 pokazano w izolowanych systemach komórkowych i bezkręgowcach, które mają być kontrolowane przez transkrypcję palca cynkowego. czynnik GATA3, który jest niezbędny do różnicowania i aktywacji komórek Th2 i jest uważany za główny czynnik transkrypcyjny szlaku aktywacji immunologicznej Th2.6 Nadekspresję GATA3 obserwowano w próbkach pobranych z płukania oskrzelowo-pęcherzykowego i biopsji płuca uzyskanych od pacjentów z ciężka astma, nawet gdy otrzymują intensywną terapię.7 W związku z tym opracowywane są interwencje, które mogą zakłócić tę sieć immunologiczną – w tym terapie ukierunkowane na komponenty poniżej czynnika transkrypcyjnego GATA3 – w celu leczenia astmy.8
Ponieważ GATA3 ulega ekspresji tylko w procesach wewnątrzkomórkowych, opracowaliśmy specyficzny dla GATA3 enzym DNA (DNAzyme) o zdolności penetracji komórek in vivo. DNAzymy są aktywnymi katalitycznie, jednoniciowymi, syntetycznymi cząsteczkami antysensownymi DNA, które nie występują w przyrodzie. DNAzyme hgd40 – aktywny produkt leczniczy w SB010 – składa się z 34 zasad. Dziewięć zasad w regionie 3 i 5 tworzy dwie domeny wiążące, które są wysoce swoiste dla wiązania docelowego informacyjnego RNA (mRNA) GATA3. Centralny rdzeń cząsteczki reprezentuje domenę katalityczną, która odpowiada za rozszczepienie celu po związaniu hgd40 z mRNA GATA39,10 (ryc. S1 i S2 w dodatkowym dodatku, dostępne wraz z pełnym tekstem tego artykułu)
[więcej w: dinoprost, anatomia palpacyjna, laserowe obkurczanie pochwy ]

Powiązane tematy z artykułem: anatomia palpacyjna dinoprost laserowe obkurczanie pochwy