Konstytucyjna aktywacja katalitycznej jednostki PKA w zespole nadnerczy AD 5

Panel C pokazuje ideogram chromosomu 19 z genami zawartymi w paśmie p13.2-p13.12 (GRCh37 / h19). Czarne bloki reprezentują rozmiar i położenie duplikacji. Szare bloki reprezentują geny zawarte tylko we współużytkowanym regionie duplikacji. Czerwony blok reprezentuje PRKACA. Continue reading „Konstytucyjna aktywacja katalitycznej jednostki PKA w zespole nadnerczy AD 5”

Transfekcja i obrazowanie metoda FRET

Transfekcję i obrazowanie metodą FRET przeprowadzono jak opisano wcześniej25. Zastosowano równomolowe stężenia przepuszczalnej dla komórek pary synergicznych analogów cAMP do aktywacji PKA II.26. Kwantyfikacja aktywności enzymatycznej PrKACA i enzymu PKA
Lizaty całych komórek lub tkanek badano pod kątem ekspresji podjednostek PKA C? za pomocą Western blotting z użyciem specyficznego przeciwciała (sc-903, Santa Cruz Biotechnology). Komórki COS-7 transfekowano za pomocą X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent (Roche) i 500 ng plazmidowego DNA na studzienkę przez 24 godziny. Continue reading „Transfekcja i obrazowanie metoda FRET”

Pacjenci z zespolem Cushinga

Pacjentów sklasyfikowano jako mających jawny zespół Cushinga, jeśli mieli co najmniej trzy nieprawidłowe wyniki testów biochemicznych lub jeśli mieli typowe cechy kataboliczne (tj. Osłabienie mięśni, kruchość skóry i osteoporozę) plus co najmniej dwa nieprawidłowe wyniki testów biochemicznych. Uważano, że pacjenci mają endokrynne nieczynne zmiany nadnerczowe, jeśli mieli prawidłowe wyniki biochemiczne i brak objawów katabolicznych. Wszyscy pacjenci, którzy nie mieli objawów katabolicznych, ale mieli co najmniej jeden nieprawidłowy wynik w wyżej wymienionych badaniach, zostali sklasyfikowani jako mający subkliniczny zespół Cushinga. Continue reading „Pacjenci z zespolem Cushinga”

Konstytucyjna aktywacja katalitycznej jednostki PKA w zespole nadnerczy

Zespół Cushinga niezależny od kortykotropiny jest spowodowany przez nowotwory lub rozrost kory nadnerczy. Molekularna patogeneza gruczolaków nadnercza wytwarzających kortyzol nie jest dobrze poznana. Metody
Przeprowadziliśmy sekwencjonowanie exome próbek tkanek nowotworowych od 10 pacjentów z gruczolakami nadnercza wytwarzającymi kortyzol i ocenialiśmy nawracające mutacje w genach kandydujących u dodatkowych 171 pacjentów z guzami kory nadnerczy. Przeprowadzono również analizę liczby kopii genomewidu u 35 pacjentów z hiperplazjami kory nadnerczy wydzielającymi kortyzol. Continue reading „Konstytucyjna aktywacja katalitycznej jednostki PKA w zespole nadnerczy”