Transfekcja i obrazowanie metoda FRET

Transfekcję i obrazowanie metodą FRET przeprowadzono jak opisano wcześniej25. Zastosowano równomolowe stężenia przepuszczalnej dla komórek pary synergicznych analogów cAMP do aktywacji PKA II.26. Kwantyfikacja aktywności enzymatycznej PrKACA i enzymu PKA
Lizaty całych komórek lub tkanek badano pod kątem ekspresji podjednostek PKA C? za pomocą Western blotting z użyciem specyficznego przeciwciała (sc-903, Santa Cruz Biotechnology). Komórki COS-7 transfekowano za pomocą X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent (Roche) i 500 ng plazmidowego DNA na studzienkę przez 24 godziny. Continue reading „Transfekcja i obrazowanie metoda FRET”

Choroba i wyniki kliniczne u pacjentów z Ebolą w Sierra Leone AD 2

Tutaj przedstawiamy dostępne dane dotyczące pierwszych 106 pacjentów, u których zdiagnozowano EVD, gdy choroba rozprzestrzeniła się na Sierra Leone, aby zapewnić podstawę do zrozumienia choroby klinicznej. Metody
Pacjenci
Przed wykryciem EVD w Sierra Leone pacjenci zostali skierowani do szpitala Kenema Government Hospital w celu przeprowadzenia badań i leczenia, jeśli mieli chorobę spełniającą definicję podejrzewanego przypadku Lassa.11 Po wykryciu pierwszych przypadków EVD pacjenci zostali skierowani, jeśli przedstawiono chorobę, która spełniała definicję przypadku Światowej Organizacji Zdrowia dla EVD.13
Zbieranie danych
Wszystkie kliniczne i laboratoryjne formularze do zbierania danych były używane w szpitalu Kenema Government Hospital w celu leczenia pacjentów z wirusową gorączką krwotoczną przed epidemią EVD. Ponadto wprowadzono protokół pobierania krwi w celu uzyskania próbek, jeśli uznał to za stosowny lekarz prowadzący, od wszystkich pacjentów przyjętych na oddział. Dane demograficzne, kliniczne i dane dotyczące leczenia rejestrowano na standardowych formularzach, które utrzymywano poza oddziałem, a następnie łączono i analizowano po zwolnieniu wszystkich pacjentów w tej kohorcie.
Analiza metaboliczna
Próbki surowicy analizowano za pomocą biochemicznego analizatora krwi Piccolo i kompleksowych dysków z odczynnikami metabolicznymi (Abaxis), zgodnie z zaleceniami producenta. Przeprowadzono pomiary metaboliczne, które obejmowały poziomy sodu, potasu, całkowitego dwutlenku węgla, chlorków, glukozy, wapnia, azotu mocznikowego we krwi, kreatyniny, fosfatazy alkalicznej, aminotransferazy alaninowej (ALT), aminotransferazy asparaginianowej (AST), bilirubiny całkowitej, albuminy i totalna proteina.
EBOV Diagnostics, Viral Load i Genomics
Próbki pobraliśmy przy użyciu protokołów zbiórki i przetwarzania w szpitalu rządowym w Kenema zgodnie z wytycznymi ratownictwa medycznego ustanowionymi przez Ministerstwo Zdrowia i Sanitaryzacji Sierra Leone. Continue reading „Choroba i wyniki kliniczne u pacjentów z Ebolą w Sierra Leone AD 2”

Alergenowe reakcje astmatyczne zmodyfikowane przez specyficzny dla GATA3 DNAzym AD 2

Enzym hgd40 wykazał skuteczność w przedklinicznych modelach alergicznego zapalenia dróg oddechowych i znacząco obniżył poziom zarówno mRNA GATA3, jak i białka, a następnie wytwarzał cytokiny Th2 w ludzkich limfocytach T i eksplantach tkankowych11,12 (ryc. S3 w dodatkowym dodatku ). Ponieważ niepożądane działania niepożądane nie zostały odnotowane 13,14, a ponieważ nie stwierdzono żadnych poważnych problemów związanych z bezpieczeństwem w trzech ostatnio zakończonych, randomizowanych, kontrolowanych placebo badaniach fazy z zwiększaniem dawki, 15 przeprowadziliśmy to badanie fazy 2a w celu oceny skuteczności. SB010. Metody
Projekt badania i nadzór
Rysunek 1. Rysunek 1. Projekt badania i badanie przesiewowe i losowanie.Panel A przedstawia przegląd projektu badania i procedur. Continue reading „Alergenowe reakcje astmatyczne zmodyfikowane przez specyficzny dla GATA3 DNAzym AD 2”

Choroba i wyniki kliniczne u pacjentów z Ebolą w Sierra Leone AD 5

Większość pacjentów zmarłych z powodu EVD miała kwasicę przy przyjęciu lub kwasicy, która rozwinęła się podczas hospitalizacji. Wśród pacjentów, którzy zmarli, stężenie azotu mocznikowego we krwi i kreatyniny stopniowo wzrastało z czasem, co sugeruje, że odwodnienie i pogorszenie czynności nerek odegrały istotną rolę w ich przebiegu w szpitalu. Pacjenci, którzy zmarli, częściej utrzymywali podwyższenie poziomu AST, ALT lub fosfatazy alkalicznej (zwłaszcza AspAT) niż pacjenci, którzy przeżyli. Bilirubina całkowita była nieznacznie podwyższona u tylko jednego pacjenta, który zmarł, co sugeruje, że hemoliza i niewydolność wątroby nie są głównymi składnikami EVD. Opracowanie systemu oceniania
Systemy oceny punktowej, takie jak zmodyfikowana Fizjologia Ostra i Chroniczna Ocena Zdrowia (APACHE), zostały użyte w ustawieniach ograniczonych do zasobów jako wskaźniki prognostyczne.16,17 Chociaż taki system oceny EVD wymagałby walidacji zanim mógł zostać użyty, możliwe jest opracowanie systemu podobnego do APACHE w celu przewidywania ryzyka zgonu z wykorzystaniem danych klinicznych dostępnych podczas prezentacji. Inne miary, które różniły się istotnie pomiędzy pacjentami ze śmiertelnym EVD a osobami z nieżowotworowym EVD, przedstawiono w Tabeli S11 w Dodatku Uzupełniającym.
Dyskusja
W Kenema Government Hospital infrastruktura badawcza już istniała, aby umożliwić zbieranie danych na początku epidemii EVD w Sierra Leone. Continue reading „Choroba i wyniki kliniczne u pacjentów z Ebolą w Sierra Leone AD 5”

Choroba i wyniki kliniczne u pacjentów z Ebolą w Sierra Leone AD 4

Jedynymi objawami istotnie związanymi z zakończeniem zgonu były: osłabienie (p = 0,003), zawroty głowy (p = 0,01) i biegunka (p = 0,04). Wśród pacjentów z biegunką 94% zmarło, podczas gdy tylko 65% osób bez biegunki po prezentacji zmarło. Dowody krwawienia stwierdzono tylko u pacjenta. Żaden z pozostałych 43 pacjentów nie miał objawów krwotocznych podczas pobytu w szpitalu, ale nie można definitywnie wykluczyć takiej możliwości z powodu ograniczonego tworzenia wykresów. Rycina 3. Rycina 3. Objawy życiowe u pacjentów ze śmiertelnym i nieżołądkowym EVD. Continue reading „Choroba i wyniki kliniczne u pacjentów z Ebolą w Sierra Leone AD 4”

AZD9291 w niedrobnokomórkowym raku płuc opornym na inhibitory EGFR AD 2

Przeprowadziliśmy badanie fazy w celu określenia bezpieczeństwa i skuteczności AZD9291 u pacjentów z zaawansowanym NSCLC z mutacją EGFR, u których rozwinęła się oporność na leczenie inhibitorami kinazy tyrozynowej EGFR. Metody
Pacjenci
Pacjenci kwalifikowali się do włączenia do badania, jeśli mieli miejscowo zaawansowanego lub przerzutowego NSCLC, jeśli mieli znaną mutację uwrażliwiającą na inhibitor kinazy tyrozynowej EGFR lub mieli wcześniejszą korzyść kliniczną (zgodnie z definicją kryteriów Jackmana w Tabeli S1 Dodatku Uzupełniającego22) od leczenia inhibitorem kinazy tyrozynowej EGFR, i jeśli mieli radiologicznie udokumentowaną progresję choroby, podczas gdy wciąż otrzymywali takie leczenie. Nie było górnej granicy liczby wcześniejszych inhibitorów EGFR lub terapii ogólnoustrojowych. Szczegóły dotyczące testowania EGFR T790M oraz kryteriów włączenia i wyłączenia znajdują się w Dodatkowym dodatku.
Przestudiuj badanie
Badanie to przeprowadzono zgodnie z zasadami Deklaracji Helsińskiej i wytycznymi Dobrej Praktyki Klinicznej Międzynarodowej Konferencji Harmonizacji. Protokół, który jest dostępny na stronie, został zatwierdzony przez lokalną instytucję kontrolną każdej uczestniczącej strony. Wszyscy pacjenci wyrazili pisemną świadomą zgodę przed badaniem. Continue reading „AZD9291 w niedrobnokomórkowym raku płuc opornym na inhibitory EGFR AD 2”

Alergenowe reakcje astmatyczne zmodyfikowane przez specyficzny dla GATA3 DNAzym AD 4

Obliczenie wartości AUC było oparte na procentowej wartości wyjściowej wartości FEV1 w czasie przy użyciu reguły trapezów, zgodnie z opisem w planie analizy statystycznej w protokole. Czterech pacjentów w grupie SB010 i trzech pacjentów w grupie placebo miało późną odpowiedź astmatyczną tylko w pierwszym badaniu prowokacji alergenem wstępnym. W przypadku tych pacjentów dane dotyczące czynności płuc w tym wyzwaniu zastosowano jako wartość wstępną; dla wszystkich innych pacjentów, wartością podstawową była odpowiedź na drugie wywołanie alergenu wykonane bezpośrednio przed leczeniem. Inne punkty końcowe analizowano również za pomocą tego samego modelu lub z testami sumy rang Wilcoxona. Wyniki dotyczące bezpieczeństwa wymieniono w zależności od pacjenta i obliczono statystyki opisowe. Dalsze szczegóły dotyczące metod statystycznych podano w protokole. Wyniki
Pacjenci
W grupie SB010 21 pacjentów ukończyło wszystkie badania; w grupie placebo 18 ukończyło ocenę późnej odpowiedzi na astmę, a 19 ukończyło ocenę wczesnej odpowiedzi na astmę (ryc. Continue reading „Alergenowe reakcje astmatyczne zmodyfikowane przez specyficzny dla GATA3 DNAzym AD 4”

Randomizowana, kontrolowana próba 3,0 mg Liraglutydu w kontroli wagi AD 4

Grupa liraglutydu miała również większą redukcję niż grupa placebo w średnim obwodzie talii i BMI (tabela 2). Kilka analiz czułości potwierdziło wyższość liraglutydu w stosunku do placebo w odniesieniu do końcowych punktów odniesienia (Tabela Liraglutyd okazał się być mniej skuteczny u pacjentów ze średnim BMI 40 lub wyższym niż u pacjentów z niższym BMI (ryc. S4 w Dodatkowym dodatku). Szacowane średnie zmiany masy ciała i drugorzędowych punktów końcowych przedstawiono w tabelach S6 i S8 w dodatkowym dodatku.
Kontrola glikemiczna
Ryc. 2. Ryc. Continue reading „Randomizowana, kontrolowana próba 3,0 mg Liraglutydu w kontroli wagi AD 4”

Wczesna diagnoza zawału mięśnia sercowego z czułymi testami na troponinę sercową ad 7

W przypadku rozpoznania ostrego zawału mięśnia sercowego lub niestabilnej dławicy ujemna wartość predykcyjna ujemnego wyniku testu (zdefiniowanego jako wartość poniżej 99. percentyla z poziomem niedokładności poniżej 10%) wynosiła 77%, 82%, 74%, i 79% dla czterech czułych testów, odpowiednio. Dyskusja
To prospektywne, wieloośrodkowe badanie z udziałem niewyselekcjonowanych pacjentów badało diagnostyczną skuteczność nowych, czułych testów troponin sercowych do wczesnego rozpoznania ostrego zawału mięśnia sercowego w czasie prezentacji pacjenta do oddziału ratunkowego. Zgłaszamy cztery główne odkrycia, które mogą poprawić zdolność do decydowania i wykluczania ostrego zawału mięśnia sercowego. Po pierwsze, dokładność diagnostyczna czterech czułych testów na troponinę sercową była już bardzo wysoka w momencie prezentacji. Continue reading „Wczesna diagnoza zawału mięśnia sercowego z czułymi testami na troponinę sercową ad 7”

Paradoks nadciśnienia tętniczego – bardziej niekontrolowana choroba pomimo poprawy terapii ad 7

Czynniki ryzyka dla nadciśnienia tętniczego. Kilka czynników może przyczynić się do rozwoju nadciśnienia tętniczego (Tabela 3) .26 Ostatnie analizy genomewidów ujawniły kilka polimorfizmów pojedynczego nukleotydu (loci genotoksycznych) genów, które są związane z ciśnieniem krwi. 50,51. Czy którykolwiek z tych SNP okaże się być cele dotyczące zapobiegania lub leczenia nadciśnienia tętniczego nie zostały jeszcze ustalone. Spożycie soli i masa ciała są szczególnie ważne w związanym z wiekiem zwiększeniu ciśnienia krwi. Continue reading „Paradoks nadciśnienia tętniczego – bardziej niekontrolowana choroba pomimo poprawy terapii ad 7”